CELL-WISE 293培養(yǎng)基品
貨號(hào):CW001
CELL-WISE 293培養(yǎng)基品牌產(chǎn)品特點(diǎn):
瞬時(shí)轉(zhuǎn)染用培養(yǎng)基,適用于HEK293細(xì)胞高密度懸浮培養(yǎng)
無蛋白、無動(dòng)物源、化學(xué)成分限定
即用型培養(yǎng)基,無需添加額外成分
CELL-WISE的293培養(yǎng)基參數(shù)規(guī)格:
外觀:
澄清透明紅色液體
滲透壓:
275±15 mOSM
pH:
6.9-7.4
無菌檢測:
無菌
內(nèi)毒素:
<5 EU/mL
儲(chǔ)存條件
:2-8℃,避光
效期:
12個(gè)月
產(chǎn)品用途:
僅用于科學(xué)研究,不適用于人類或動(dòng)物的診斷和治療
CELL-WISE的293培養(yǎng)基使用方法:
細(xì)胞馴化
1)直接馴化
大部分情況下,培養(yǎng)于其他培養(yǎng)基中的細(xì)胞,可以直接適應(yīng)Balance CD 293 medium,只要按照日常傳代方式(稀釋)更換培養(yǎng)基即可。
2)漸進(jìn)式馴化
注意:選用低代次、處于對(duì)數(shù)生長期的細(xì)胞進(jìn)行馴化
①在原培養(yǎng)基中復(fù)蘇細(xì)胞并繼續(xù)使用該培養(yǎng)基傳代2到3次至細(xì)胞生長穩(wěn)定,當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到2x10 6 cells/ml后進(jìn)行傳代,傳代細(xì)胞密度控制在0.5-0.6×10 6 cells/mL,5-10%血清的傳統(tǒng)培養(yǎng)基或其他無血清培養(yǎng)基與Balance CD 293培養(yǎng)基的比例為75:25;
②將細(xì)胞置于37℃,5% CO2,轉(zhuǎn)速為110-175 rpm的恒溫?fù)u床中進(jìn)行培養(yǎng);
③當(dāng)細(xì)胞密度3-4天后達(dá)到3x10 6 cells/ml且細(xì)胞活率>90%,傳代時(shí)5-10%血清的傳統(tǒng)培養(yǎng)基或其他無血清培養(yǎng)基與Balance CD 293培養(yǎng)基的比例為50:50,細(xì)胞密度控制在0.5×10 6 cells/mL。如細(xì)胞生長慢,可離心上清,留20%條件培養(yǎng)基,加入80%的5-10%血清的傳統(tǒng)培養(yǎng)基或其他無血清培養(yǎng)基與Balance CD 293 培養(yǎng)基比例為75:25的混合培養(yǎng)基,繼續(xù)培養(yǎng);
④重復(fù)步驟③逐步增加Balance CD 293培養(yǎng)基所占的比例(5-10%血清的傳統(tǒng)培養(yǎng)基或其他無血清培養(yǎng)基與Balance CD 293 培養(yǎng)基的比例為25:75至10:90)直到100%的Balance CD 293培養(yǎng)基;
⑤經(jīng)過在100%的 Balance CD 293 培養(yǎng)基中的幾次傳代培養(yǎng),傳代后3-4天細(xì)胞的密度可以達(dá)到2-3×10 6 cells/mL,細(xì)胞活率大于90%,這說明細(xì)胞已經(jīng)適應(yīng)了Balance CD 293 培養(yǎng)基。之后進(jìn)行細(xì)胞的傳代培養(yǎng)時(shí),細(xì)胞的起始密度可以降到0.3×10 6 cells/mL,般傳代2-3次后再進(jìn)行轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)。
注意: 般細(xì)胞馴化過程中,三代細(xì)胞的狀態(tài)可能不是很好,但般從第四代狀態(tài)會(huì)有改善。